تنقية جزئية لأنزيم الفنيل الالنين هيدروكسيلز من ادرار المصابيين بالفشل الكلوي المزمن

Partial Purification of phenylalanine hydroxylase from urine of patients with chronic renal failure

Al-Salihi, F. G.^* ;Shaker, A. H.*      and AL-Taie,  A. K.**

*Department of chemistry, college of education for women,University of Tikrit, Tikrit, Iraq.

** Department of chemistry,College of Education , University of Tikrit , Tikrit. Iraq

Abstract:

This study  include purification of  Phenylalanni hydroxylase ( PAH)  from patients urine with chronic renal failure. The purification steps include,protein  precipitation with ammonium sulphate solution. And ion exchange chromatography by using   (DEAE – Cellulose A – 50) as anionic exchanger  . Then two isoenzymes (I,II) were seperated through gel filtration by using  (sephadex G-200) with purification  folds  20.5 & 23.7 respectivily .

the research also  include the kinetics studies of the two partially purified isoezymes (I&II) . The Km values were 4 mM .The two isoenzymes  shown an optimum pH at 7.2, and optimum temperature at 25 Cº.

تنقية جزئية لأنزيم الفنيل الالنين هيدروكسيلز من ادرار المصابيين بالفشل الكلوي المزمن

                فراح غالي الصالحي     اسماء هاشم شاكر                               عبدالرحمن خضير

                     قسم الكيمياء / كلية التربية للبنات                               قسم الكيمياء /كلية التربية

                            جامعة تكريت                                               جامعة تكريت

الملخص:                        

تضمن البحث فصل وتنقية انزيم الفنيل الالنين هيدروكسيلز (PAH ) جزئياً من ادرار المصابيين بالفشل الكلوي المزمن  ، حيث شملت التنقية عدة خطوات ابتداءاً بالترسيب بأضافة  محلول كبريتات الامونيوم  وثم التخلص من الاملاح بأستخدام G – 25 Sephadex وثم  استخدام الجزء البروتيني  المفصول من Sephadex G-25  وتنقيته  باستخدام كروماتوغرافيا التبادل الايوني (DEAE – Cellulose A – 50 ) ، وثم تم اعادة الترسيب بمحلول كبريتات الامونيوم ، وثم اخذ الجزء المفصول وفصلة باستخدام Sephadex G – 200 حيث تم الحصول على متناظريين لـ (PAH ) وبدرجات نقاوة متفاوتة ( 20.5 و23.78 مرة ).

وشمل البحث ايضاً الدراسات الحركية للمتناظرات المفصولة اعلاه قييم الثابت Km للمتناظريين المنقاة من ادرار مرضى الفشل الكلوي المزمن ، و كان التركيز الامثل للمادة الاساس لكل المتناظرين I ,II (4 ) ملي مولار : كما درس تاثير الاس الهيدروجيني للمتناظريين حيث كانتpH المثلى (7.2) في حين كانت درجة الحرارة المثلى 25 Cº.

تحميل البحث