قياس فعالية انزيم الفوسفاتيز القاعدي من لعاب مرضى داء السكر وتنقية متناظراته جزئيا
Estimation of alkaline phosphatase from salivaof diabetic patients
and partial purification of it’s isoenzymes
Ferah Ghali Al-Salihi* Asra’a Ismaeel Yaseen* Nazar Ahmed Najy**
*Chemistry Department / College of Education for Women / Tikrit University
**Chemistry Departmen / College of Science / Tikrit University
Abstract
This study was performed on 181 saliva specimens of diabetic patients ( 59 of type 1 & 122 of type 2 ), in addition 149 healthy saliva specimens were investigated as control group.The result of this study showed a significant increase (p=0.000) in activity of salivary alkaline phosphatasefrom diabetic patients (both types ) compared to healthy subjects.
Three isoenzymes were isolated from saiva of diabetic patients by addition of ammonium sulphate ,dialysis and ion-exchange (DEAE-Cellulose A-50) ,Isoenzyme I was partially purified by gel –filteration using Sephadex G-100 and showed a single band through electrophoresis by using SDS-PAGE andCoomassie blue R250 dye.
قياس فعالية انزيم الفوسفاتيز القاعدي من لعاب مرضى داء السكر وتنقية متناظراته جزئيا
أ.د.فراح غالي الصالحي* م.م.اسراء اسماعيل ياسين* أ.د.نزار احمد ناجي**
*جامعة تكريت / كلية التربية للبنات / قسم الكيمياء
**جامعة تكريت / كلية العلوم / قسم الكيمياء
الخلاصة :
تضمنت الدراسة الحالية قياس مستوى انزيم الفوسفاتيز القاعدي في لعاب مرضى داء السكر وكذلك فصل وتنقية جزئية لمتناظرات هذا الانزيم، حيث شملت 181 عينة لعاب من مرضى داء السكر بكلا نوعيه ( 59 عينة من النوع الاول المعتمد على الانسولين و 122 عينة من النوع الثاني غير المعتمد على الانسولين) اضافة الى 149عينة من الاشخاص الاصحاء ومن كلا الجنسين . وقد اظهرت نتائج هذه الدراسة ارتفاعا معنويا ملحوظا عند مستوى احتمالية (p=0.000) بفعالية الفوسفاتيز القاعدي في لعاب مرضى داء السكر بكلا نوعيه.
وتم ايضا فصل وتنقية متناظرات الفوسفاتيز القاعدي من لعاب المصابين بداء السكر من خلال الترسيب بكبريتات الامونبوم والديلزة وبأستخدام تقنية كروماتوغرافيا التبادل الايوني(DEAE-Cellulose A-50) تم فصل ثلاث متناظرات انزيمية تختلف في درجة تنقيتها . وبأستخدام تقنية الترشيح الهلامي (Sephadix G-100)تم تنقية المتناظرІ جزئيا وعند استخدام طريقة الفصل بالترحيل الكهربائي على هلام SDS-PAGE بتركيز 10% وبإستعمال صبغة Coomassie blue R250 أظهر هذا المتناظر حزمة منفردة.