Detection of specific antibodies of Escherichia coli O157:H7 isolated
from children by using Eliza test
Afaf Abdul-Rahman Yousif and Faten A. A. Al –Dawmy
Zoonosis Unit, College of Veterinary Medicine, University of Baghdad
Keywords children, E.coli O157: H7, antibodies, ELISA test.
Received (November) , Accepted (June).
ABSTRACT
This study comprises two parts: part one was conducted to isolate E.coli O157: H7 from children in Pediatric Hospital of Karballa city. The bacteria were identified by bacteriological, biochemical and serological methods.( 14 )isolates of E.coli O157:H7 isolated from children with diarrhea (230) and children had urinary tract infection(200) were isolated.
Part two of the study was included detection of antibodies against E.coli O157:H7 somatic (inactivated bacterium by heating) and flagellar (inactivated bacterium by formaldehyde) antigens in rabbits by using ELISA test. Twelve adult healthy rabbits were divided randomly for three equal groups A, B and C used for immunization study. All rabbits had negative fecal bacteriological culture of E.coli O157:H7 and serum was collected before immunization.
Serum antibodies titers were estimated by using ELISA and tube agglutination test pre and post each immunization. No antibody titers were detected Pre immunization in all rabbits. Elisa test revealed that the group (A) showed a significant variation between the value of antibody titers in the 2nd week and 4th week post immunization. Also in group (B) there was a significant variations between the antibody titers in the 2th week and 4th week post immunization. Group (A) revealed low significant (p ≤ 0.05) antibody titers in serum (0.37±0.02) in comparison with group(B) which exhibited antibody titers in serum (0.44±0.04). No antibody titers was detected in rabbits of the control group (C) during the same weeks intervals. Antibody titers were estimated by tube agglutination test in immunized groups revealed significant (p ≤ 0.05) antibody titers in serum (440±120) in group A in comparison with group-B which exhibited antibody titers in serum (560±80).Our study concluded the importance of detection Escherichia coli O157:H7 in children and that enzyme- linked immunosorbent posses the ability for detection antibodies against this bacteria.
تقدير الأضداد الخاصة ببكتريا E. coli O157:H7 المعزولة من الأطفال باستخدام اختبار الاليزا
عفاف عبد الرحمن يوسف , فاتن عبد الكاظم خلف
وحده الامراض المشتركة /كليه الطب البيطري /جامعه بغداد /العراق
مفاتيح الكلمات : الأطفال, بكتريا, E.coli O157:H7 ,الأجسام المضادة ,اختبار الاليزا.
الخلاصة
شملت هذه الدراسة جزئين: الجزء الأول أجري لعزل بكتريا الاشريشيا القولونية O157: H7 من الأطفال في مستشفى الأطفال في محافظه كربلاء. شخصت هذه البكتيريا بالطرق البكتريولوجية والكيميائية الحيوية والمصلية. تم عزل أربعة عشر عزله من اما الجزء الثاني من الدراسة فقد شمل الكشف عن الأجسام المضادة ضد مستضد E.coli157:H7 الجسمي المثبط بالحرارة وكذلك ضد المستضد السوطي المثبط بالفور مالين في الأرانب باستخدام اختبار تلازن الانبوب و اختبار الاليزا ((ELISA. قسمت اثنا عشر أرانب كانت بالغه و بصحة جيده لثلاث مجموعات متساوية A، B و C استخدمت للدراسة المناعية. جميع الأرانب أعطت نتيجة سلبيه للزرع البكتريولجي وقد جمع المصل منها قبل التمنيع . حقنت المجموعة A بجرعة (1 مل) يحتوي على(108 خليه /مل) من المستضد الجسمي تحت الجلد في الظهر بجرعتين خلال أسبوعين بين جرعه وأخرى, والمجموعة (B)جرعت بالمستضد السوطي (بنفس الطرق) ثم حقنت المجموعة الثالثة ( C) واحد مل من محلول دارئ الفوسفات الملحي المعقم كمجموعه سيطرة. تم تقييم مستوى الاجسام المضادة بوساطة اختبار التلازن الانبوب حيث اعطى زياده معنوية على مستوى (p ≤ 0.05) واضحة للمجموعة الممنعة الثانية(560±80). مقارنتا بالمجموعة الاولى (440±120) التي اعطت اقل مستوى بالأجسام المضادة في مصل الدم. وايضا تم تقدير مستوى الأجسام المضادة قبل وبعد التمنيع باستخدام فحص الأليزا. لم يظهر اي مستوى للأجسام المضادة قبل التمنيع في كل الأرانب, بعد التمنيع كشفت نتائج اختبار الاليزا أن المجموعة ((A أظهرت تباين كبير في مستوى الأجسام المضادة في الأسبوع الثاني والأسبوع الرابع بعد التميع ,وكذلك المجموعة( B) أظهرت تباين كبير في مستوى الأجسام المضادة في الأسبوع الثاني والأسبوع الرابع بعد التمنيع .المجموعة A) )أشارت إلى اختلاف قليل في مستوى الأجسام المضادة في المصل(0.37±0.02 ) بالمقارنة مع المجموعة B التي أظهرت مستوى الأجسام المضادة في المصل( 0.44±0.04) ولا يوجد مستوى للأجسام المضادة خلال نفس الفترة .
استنتجنا من هذه الدراسة أهميه الكشف عن الاشيريشيا المعوية E.coli O157:H7 في الأطفال وان فحص الاليزا يمتلك القدرة للكشف عن الأجسام المضادة ضد هذه البكتريا .
تحميل البحث
