Determination of Atenolol in Human Plasma by New HPLC Method with Fluorescence Detection for Pharmacokinetics Studies
Ahmed A. Hussein
Department of Pharmaceutics, College of Pharmacy, Baghdad University. Baghdad, Iraq
Email: ahmed_abbas201383@yahoo.com
Keywords: Atenolol, RP- HPLC and validation, Pharmacokinetics study, Human plasma.
(Received :February 2014, Accept : Jun 2014)
ABSTRACT
Purpose:A new, sensitive, specific and precise HPLC analysis method was developed for the determination of atenolol in human plasma in order to be utilized for pharmacokinetics study. Methods:The drug was extracted from plasma by liquid-liquid extraction technique using dichloromethane: 2-propanol (75:25). Bamethan sulfate was used as internal standard (IS). Samples were analyzed on ODS-3 C18Intertsil column (150 x 4.6 mm, 5 µm), applying triethylamine (0.5%): methanol at a ratio of 90:10v/v with a final pH of 3.5 in isocratic mode as a mobile phase at a flow rate of 1.3 ml/min to attain adequate resolution. Using a Spectra autosampler, separations were performed at room temperature and monitored at an excitation wavelength of 228 nm and an emission wavelength of 298 nm after injection a 60μlsample into the HPLC system.
Results: A peak area was obtained for atenolol and bamethan with 6.4 and 10.4min retention time, respectively. The lower limit of quantitation (LLOQ) was identifiable and reproducible at 10ng/ml with a precision of 1.754%. The intra-day and inter-day precision at 30, 400 and 700 ng /ml level was found to be 1.909%, 1.571% , 1.358% and 3.229, 1.471, 3.246 respectively, always lower than the accepted criteria limits (15%). The relative recovery% of atenolol at 30, 400, and 700ng/ml was found to be 100.733, 99.948, and 98.599 respectively. Conclusions:The analysis method was found to be sensitive, accurate, and precise for the quantification of atenolol in human plasma. It was applied successfully, for pharmacokinetics studies.
تحديد أتينولول في بلازما الإنسان من الطريقة HPLC جديد مع كشف الإسفار للدراسات الدوائية
أحمد عبد الحسين
قسم الصيدلانيات، كلية الصيدلة، جامعة بغداد. بغداد، العراق
الكلمات الرئيسية: أتينولول، RP-HPLC والتحقق والدراسة الدوائية، والبلازما البشرية.
(حصل على: فبراير 2014، وقبول: يونيو 2014)
الملخص
وقد تم تطوير وحساسة، أسلوب التحليل HPLC محددة ودقيقة جديدة لتحديد أتينولول في البلازما البشرية من أجل استخدامها لالدوائية الدراسة: الغرض. الأساليب: تم استخراج المخدرات من البلازما بواسطة تقنية استخراج السائل السائل باستخدام ثنائي كلورو ميثان: 2 بروبانول (75:25). تم استخدام كبريتات Bamethan وفقا لمعايير داخلية (IS). وقد تم تحليل العينات على العمود المواد المستنفدة للأوزون 3 C18 Intertsil (150 × 4.6 مم، 5 ميكرون)، وتطبيق الترايثلامين (0.5٪): الميثانول بنسبة 90:10 ت / ت مع الرقم الهيدروجيني النهائي من 3.5 في وضع isocratic كمرحلة المحمول بمعدل تدفق 1.3 مل / دقيقة لتحقيق حل ملائم. باستخدام الاوتوماتيكى الأطياف، أجريت فصل في درجة حرارة الغرفة ورصدها في الطول الموجي من 228 نانومتر الإثارة والطول الموجي من 298 نانومتر الانبعاثات بعد حقن عينة 60μl في النظام HPLC.
النتائج: منطقة ذروة تم الحصول عليها لأتينولول وbamethan مع 6.4 و الاحتفاظ 10.4min الوقت، على التوالي. وكان الحد الأدنى من الكميات (LLOQ) تحديدها واستنساخه في 10ng/ml مع دقة من 1.754٪. الدقة داخل اليوم وبين يوم 30، تم العثور على 400 و 700 مستوى نانوغرام / مل ليكون 1.909٪، 1.571٪، 1.358٪ و 3.229، 1.471، 3.246 على التوالي، دائما أقل من معايير الحدود المقبولة (15٪) . تم العثور على الانتعاش النسبي٪ من أتينولول في 30، 400، و700ng/ml أن يكون 100،733، 99،948، 98،599 و على التوالي. الاستنتاجات: تم العثور على أسلوب التحليل أن تكون حساسة ودقيقة، ودقيقة لتقدير حجم أتينولول في البلازما البشرية. تم تطبيقه بنجاح، لالدوائية الدراسات.
تحميل البحث 
